ISOLAMENTO DE FLAVONAS DE C. SINENSIS ENXERTADA SOBRE C. LIMONEA E AVALIAÇÃO DE SUAS ATIVIDADES INIBIDORAS DO GAPDH DE TRYPANOSOMA CRUZI
Cleverson Fernando Garcia (PG)1, Maria Fátima G. F. da Silva (PQ)1, Sergio Alves de Carvalho (PQ)2; Paulo César Vieira (PQ)1; João Batista Fernandes (PQ)1; Edson Rodrigues Filho (PQ)1; Glacius Oliva (PQ)3
1Departamento de Química, Centro de Ciências Exatas e Tecnologia, Universidade Federal de São Carlos
2Centro de Citricultura Sylvio Moreira / IAC
3Instituto de Física, USP – São Carlos
palavras-chave: Citrus, Trypanosoma cruzi, GAPDH
A doença de Chagas, causada pelo protozoário T. cruzi, afeta cerca de 20 milhões de pessoas, principalmente nas Américas do Sul e Central e em algumas regiões metropolitanas dos EUA [1]. No Brasil, cem mil pessoas morrem por ano, sendo oito milhões o número de infectados. O protozoário utiliza essencialmente a via glicolítica para obtenção de energia, sendo a GAPDH uma das principais enzimas.
O gênero Citrus é muito conhecido por sua importância econômica [2] e por apresentar uma grande variedade de compostos pertencentes aos flavonóides [3] cumarinas [4], alcalóides [5] e limonóides [6]. Tendo em vista o projeto de comparação e quantificação de metabólitos secundários em plantas de C. sinensis enxertadas em C. limonea, em andamento no laboratório de Produtos Naturais do DQ/UFSCar, aproveitou-se os flavonóides isolados para testes de inibição da enzima GAPDH do T. cruzi, caracterizando-se como objetivo deste trabalho.
Adquiriu-se frutos de laranja (C. sinensis x C. limonea), sendo estes divididos em cascas, frutos, sementes e bagaço. Trabalhou-se as cascas frescas, sendo estas moídas e submetidas a extração em metanol. O extrato metanólico da casca foi fracionado em uma coluna de sílica gel em meio a um gradiente de polaridade crescente. A fração 10 foi submetida a fracionamento em cromatografia de camada delgada (CCD), com diclorometano : ac. de etila 3:1 como fase móvel, obtendo-se a 3,3’,4’,5,6,7,8-heptametoxiflavona (1) e a 3’,4’,5,6,7,8-hexametoxiflavona (2).
A 3’,4’,5,6,7-pentametoxiflavona (3) foi obtida pelo fracionamento da fração 13 em diclorometano : ac. etila 3 : 2 como fase móvel, via CCD.
Purificadas e identificadas, as substâncias citadas foram testadas frente a enzima GAPDH do T. cruzi. A atividade específica (U/mg) da GAPDH para as substâncias 1, 2 e 3 foi 90%.
Assim, de acordo com os resultados obtidos, afirmar-se que o enxerto de C. sinensis x C. limonea pode-se mostrar uma fonte promissora de substâncias inibidoras de GAPDH, uma vez que várias outras frações ainda não trabalhadas apresentaram comportamento similar, possivelmente devido à presença dos flavonóides e cumarinas característicos do gênero Citrus.
[1] World Health Organization Statistical Information System Website. Em
http://www.who.ch/whosis/whosis.htm
[2] CENTRO DE CITRICULTURA SYLVIO MOREIRA / IAC, Revista 70 Anos,
Grande ABC Editora Gráfica S.A., 1998.
[3] WOLLENWEBER, E. et al., Biochem. System. Ecol., 24, 479, 1996.
[4] ELGAMAL, M.H.A., et al., Phytochemistry, 34, 819, 1993.
[5] TAKEMURA, Y. et al., Chem. Pharm. Bull., 41, 406, 1993.
[6] HERMAN, Z. et al., Phytochemistry, 24, 2911, 1985.
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