Determinação voltamétrica simultânea DE sulfeto livre e combinado em soluções de nutrição parenteral

Paulo Cícero do Nascimento* (PQ), Denise Bohrer* (PQ), Ana Lúcia Becker Rohlfes^** (PG), Adrian Ramirez* (IC), Marcello Trevisan* (IC).

*Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Departamento de Química

Campus Universitário, C. P. 5051, 97110-970 Santa Maria - RS – Brasil

**Universidade de Santa Cruz do Sul, Departamento de Química e Física

Campus Universitário, C. P. 188, 96815-900 Santa Cruz do Sul - RS - Brasil

palavras-chave: nutrição parenteral, voltametria, sulfetos

Soluções de nutrição parenteral (NP) são utilizadas como formulações intravenosas em pacientes com necessidades nutricionais específicas e em muitos casos onde a assepsia no tratamento nutricional é indispensável. Estas soluções contém cerca de 15 aminoácidos alguns dos quais com átomos de enxofre na molécula que podem ser responsáveis, a partir de reações de dessulfidrilação, pela produção de sulfetos como contaminantes destas soluções. A presença de sulfetos na forma livre (HS^-, S^2-) e combinada (R-SH, R-SS-R') é indesejável tanto do ponto de vista clínico quanto da qualidade do produto em relação às suas propriedades organolépticas. Devido à complexidade das soluções de NP a análise destes contaminantes em concentrações muito baixas (µg l^-1) impõe a necessidade de alguma etapa de cleanup para eliminar as interferências da matriz mesmo quando métodos cromatográficos são utilizados⁽¹⁾.

No presente trabalho, sulfeto livre (S^2-) e combinado (CH₃SH, C₂H₅SH) foram quantificados simultaneamente em soluções de NP por voltametria após separação dos analitos em frascos de Conway⁽²⁾ com pequenos volumes de solução absorvente.

As medidas voltamétricas foram realizadas num equipamento Metrohm 646 VA Processor/ 675 VA Sample Changer, operando no modo HMDE com um tempo de pré-concentração de 60 s em –300 mV. Os voltamogramas foram registrados entre –300 e –1000 mV para a obtenção dos sinais correspondentes a sulfeto combinado (-450 mV) e sulfeto livre (-650 mV). Todos os potenciais referem-se ao eletrodo de referência, Ag/AgCl 3 mol l^-1 e o volume de eletrólito (0.01 mol l^-1 NH₄Cl, pH 10 ajustado com 0,01 mol l^-1 NaOH ) utilizado na célula voltamétrica foi 19,5 ml. Frascos de Conway com volume de solução absorvente (0,01 mol l^-1 NaOH) de 0,5 ml foram utilizados no processo de separação entre os analitos e a matriz com um tempo de aquecimento da amostra de 45 min a 47 °C. Alíquotas de 10 ml de soluções de NP foram misturadas na parte inferior do frasco de Conway com 1 ml de EDTA 0,1 mol l^-1 e 9 ml de tampão de fosfato (pH 8), preparado pela mistura 1:1 de soluções 6 10^-3 mol l^-1 K₂HPO₄ e 3 10^-3 mol l^-1 KH₂PO₄ para garantir a estabilidade dos alquiltióis durante a etapa de aquecimento. Tanto a solução do eletrólito quanto a solução adicionada à amostra foram deaeradas previamente com nitrogênio.

Soluções sintéticas de NP com diferentes formulações foram preparadas para testar o método e soluções comerciais dos laboratórios Braun, Darrow, Fresenius e J.P. Indústria Farmacêutica foram analisadas.

O mecanismo de formação de sulfetos a partir das soluções de NP não está ainda perfeitamente estabelecido; contudo, espécies voláteis como sulfeto livre e algumas formas sulfetos combinados de baixo peso molecular, são freqüentes em soluções NP, mesmo dentro de seus prazos de validade. Espécies como metanotiol e etanotiol, que apresentam grupo sulfidrila, comportam-se de maneira idêntica em relação ao eletrodo de mercúrio e podem ser quantificadas como sulfeto combinado sem distinção entre uma forma e outra. A figura abaixo mostra o perfil dos sinais voltamétricos obtidos na presença de sulfeto livre e combinado nas condições descritas.

Os valores de corrente obtidos em procedimentos de calibração, utilizando os frascos de Conway, mostraram a relação i = 0,014c + 0,5 (r = 0,99) para sulfeto livre e i = 0,025c - 0,5 (r = 0,99) para sulfeto combinado, onde “i” é a corrente em nA e “c” a concentração em µg l^-1. Uma faixa linear de calibração foi observada para concentrações de sulfetos entre 100 e 700 µg l^-1 com RSD 3.5% (n=5) para 300 mg l^-1. Limites de detecção de 60 and 63 µg l^-1 foram calculados respectivamente para sulfeto livre e combinado utilizando o método descrito. Recuperações entre 90 e 110% foram obtidas a partir da adição dos analitos à amostras sintéticas e comerciais que não apresentavam originalmente as espécies em estudo.

Nove formulações comerciais foram analisadas com a metodologia proposta e apenas uma apresentou teores de sulfeto livre e combinado superiores a 200 µg l^-1 , valor máximo permitido em alguns países.

1. P. C. Nascimento, A. Ramirez, A. L. Becker; Anais da 22° Reunião Anual da SBQ, 1998, QA-069.

2. R.L. Moran, G.E. Isom, J.L. Way, Toxicol. Appl. Pharmacol. 50 (1979) 323.

CNPq, FAPERGS