SÍNTESE DO DERIVADO BIFENIL-TIOFENILPROPENAMINA E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICOBACTERIANA
Fernando Pessôa Hemerly (IC)1, Daisy Nakamura Sato(PQ)2, Ana Olívia de Souza (PQ)1 e Nelson Durán (PQ)1
1Instituto de Química, Laboratório de Química Biológica, Universidade Estadual de Campinas C.P. 6154 - CEP. 13083-970. Campinas, S.P., Brasil. 2Instituto Adolfo Lutz, Ribeirão Preto, S.P. Brasil
palavras chaves: propenamina, síntese, atividade antimicobacteriana
Segundo dados da Organização Mundial de Saúde o índice de indivíduos portadores de tuberculose é drasticamente alto e a quimioterapia atual tem sido deficiente devido a multi-droga-resistência (1). Outro fator de relevância é a co-infecção AIDS/tuberculose (2) favorecendo a necessidade do desenvolvimento de outros antibióticos.
Os derivados de propenaminas apresentam promissora atividade bacteriostática e bactericida em Mycobacterium (3). Neste estudo o derivado tiofenila foi sintetizado e sua atividade antimicobacteriana determinada. A avaliação da atividade antimicobacteriana foi realizada in vitro em cepas padrões de M. tuberculosis H37Ra ATCC 25177, M. tuberculosis H37Rv ATCC 27294, M. kansasii ATCC 12478, M. avium ATCC 15769 e M. malmoense ATCC 29571.
De acordo com o esquema 1 a uma solução contendo 1 mmol de cloreto de 2-tiofeno carbonila (I) e 1,92 mmol de AlCl3 em 10 mL de CS2, foi adicionado 1,1 mmol de 4-bromo-bifenila (II). A solução foi refluxada por 8 horas e em seguida resfriada à 0°C pela adição de gelo. O solvente foi destilado e o produto de reação extraído com CH2Cl2 e seco sob sulfato de magnésio. Após filtração o solvente foi destilado sob pressão reduzida e a metanona (III) obtida, purificada por cristalização com CH2Cl2/C6H14 e caracterizada. Em seguida, procedeu-se uma reação de Wittig. A uma solução contendo 1 mmol de brometo de b-dimetilamino etil trifenilfosfônio em 25 mL de tetrahidrofurano (THF) foi adicionado lentamente, sob atmosfera de argônio e agitação 2,2 mmol de n-butil lítio. A agitação foi mantida à 0°C durante 30 minutos. Em seguida, 1 mmol da cetona anteriormente obtida foi adicionada à mistura reacional, que foi mantida sob agitação e temperatura ambiente por 12 horas quando a reação foi interrompida pela adição de água. O THF foi destilado e a fase orgânica extraída com CH2Cl2, da qual obteve-se o produto bruto de reação (IV), o qual foi devidamente purificado e caracterizado. A caracterização dos compostos se procedeu por espectroscopia no IV, RMN 1H, espectrometria de massa e ponto de fusão de acordo com os dados abaixo:
Composto III
IV (KBr, cm-1): 1620 (n, C=O).
RMN 1H (500 MHz; CDCl3/TMS, d): 7,99-7,18 (m, 11H, Ar).
EM (m/z): 344/342 (M+· 100), 261/259 (21), 152 (36), 111 (82).
Ponto de Fusão: 106-120°C.
Composto IV
RMN 1H (500 MHz; CDCl3/TMS, d): 7,60-6,66 (m, 11H, Ar); 6,28 (1 t, 1H, -CH - E/Z, j=6,96 Hz); 6,23 (1t, 1H, -CH - E/Z, J=6,72 Hz); 3,26 (1d, 2H, -CH2 – E/Z, J=6,59 Hz); 3,01 (1d, 2H, -CH2 – E/Z, J=7,08 Hz); 2,32 (1s, 6H, -CH3, E/Z N(CH3)2); 2,26 (1s, 6H, -CH3, E/Z N(CH3)2).
EM (m/z): 399/397 (M+· 100), 384/382 (39), 314/312 (8), 166 (34), 97 (39).
Esquema 1 - Síntese da 4’-bromo[1,1’bifenil]-4-il 2-tiofeno (III) e 3-(4'-bromo-[1,1’-bifenil]-4-il)-3-(tiofeno)-N,N-dimetil-2-propen-1-amina (IV).
Para a determinação da atividade antimicobacteriana utilizamos o método colorimétrico por microdiluição em placa e revelação pelo corante Alamar Blue (4). Este corante é utilizado como indicador do crescimento micobacteriano pela ação de enzimas dehidrogenases não específicas. O 3-(4`bromo-[1,1`-bifenil-4-il)3-(3-tiofeno-N,N-dimetil-2-propen-1-amina) (IV) foi dissolvido em DMSO na concentração de 1g L-1 e as diluições subsequentes efetuadas em meio de cultura 7H9. As cepas de micobactérias foram cultivadas em meio Middlebrook 7H9 à 37°C e 100 mL foram inoculados nos poços controles contendo somente micobactéria (MB), meio de cultura (M) ou aqueles contendo diferentes concentrações das drogas (32 à 128 mg L-1). Após 7 dias determinou-se as concentrações inibitórias mínimas (CIMs). A CIM foi definida como a menor concentração da droga que inibe o crescimento micobacteriano e foram £32 mg L-1 evidenciando a atividade antimicobacteriana do bifenil-tiofenilpropenamina.
1-World Health Organization, Geneva, Switzerland. 1998.
2-Duncan, J. Pharm. Pharmacol., 49(S1):21-23. 1997.
3-De Souza e col., J. Antimicrob. Chemother. 42:407. 1998.
4-Collins e Franzblau, Antimicrob. Agents Chemother., 41: 1004, 1997.