ALCALÓIDES INDÓLICOS DE APOCYNACEA:

ESTUDO DE ESPÉCIES BRASILEIRAS DE RAUVOLFIA

Lucilia Kato¹ (PG); Raquel Marques Braga¹ (PQ);Ingrid Koch² (PG); Luciana Konecny Kohn³ (PG); Márcia Aparecida Antônio³ (PG), João Ernesto de Carvalho³(PQ)
¹ Departamento de Química Orgânica, Instituto de Química, CP 6154,
² Departamento de Botânica, Instituto de Biologia, CP 6190,

³ Lab. Ensaios Biológicos, CPQBA, CP 6171
UNICAMP, Campinas, SP.

Palavras-chave: Rauvolfia bahienses, Rauvolfia wedelliana, alcalóides indólicos

Alcalóides indólicos como a ajmalina, reserpina, yohimbina entre outros são encontrados em plantas do gênero Rauvolfia¹ (família Apocynaceae). Este gênero é fonte de importantes agentes terapêuticos. A planta indiana Rauvolfia serpentina Benth. é utilizada há várias décadas como uma fonte rica em drogas medicinais² . Particularmente, temos a reserpina, incluída no “WHO Model List Of Essential Drugs”, (OMS - Lista Modelo de Drogas Essênciais) como um agente antihipertensivo. No Brasil existem 17 espécies de Rauvolfia, segundo o último trabalho de revisão taxonômica realizado por Rao³. Destas, 14 ainda não foram quimicamente estudadas.

O nosso trabalho tem por objetivo o estudo fitoquímico de espécies brasileiras de Rauvolfia, dirigido para o isolamento e identificação de alcalóides e estudo de atividade biológica dos extratos alcaloídicos destas plantas. Iniciamos nosso trabalho com o estudo de R. bahienses. O material estudado (cascas, folhas ou raízes) foi seco, moído e submetido a extração etanólica a frio ou em extrator Soxleth. O extrato etanólico foi submetido à tratamento ácido-base, usando procedimento padrão para o isolamento de alcalóides. Após fracionamento ácido-base, o processo de separação e isolamento foi monitorado por CCD (cromatografia de camada delgada) e realizado por CCE (cromatografia em camada espessa) ou em cromatografia em coluna “flash”. A identificação foi feita usando dados de IV; UV, EM e RMN ¹H e ¹³C em 1D e 2D.

Em comunicação anterior⁴, descrevemos, que da fração diclorometânica ácida das folhas de R. bahienses, isolamos e identificamos os alcalóides: picrinina, vinorina, raucafrinolina e normacusina B .Em seguida, isolamos da fração diclorometânica básica das cascas a: norseredamina, seredamina, 10-metoxi-sarpagan-17-ol. Da fração diclorometânica ácida das cascas isolamos a norpurpelina e purpelina. Estes alcalóides já foram anteriormente isolados e tem seus dados espectroscópicos compatíveis com os da literatura. Desta última fração, isolamos e identificamos novos alcalóides indólicos, 12-metoxi-N_a-metil-sarpagan-17-al, 12-desmetoxipurpeline e 12-metoxi afinisina cujos dados de RMN foram completamente atribuídos⁵.

Dando continuidade ao trabalho isolamos ainda deste extrato, a 12-metoxi-velosimina (1). Todos os alcalóides isolados de R.bahienses possuem esqueletos ajmalan ou sarpagan.

Trabalhando com o extrato diclorometânico básico das cascas de raízes de R. weddeliana isolamos o sal de seredamina (2) , 18-hidroxi-yohimbina (3) e 3a-epi-yohimbina (4). O início do tratamento do extrato diclorometânico ácido das cascas de raízes de R. weddeliana pemitiu o isolamento da reserpina (5), importante fármaco utilizado como antihipertensivo.

Quadro1: Alcalóides isolados de R. bahienses e R. weddeliana.

Testes de atividade antiproliferativa em cultura de células tumorais com o extrato etanólico obtido das cascas de raízes de Rauvolfia weddeliana, LKRW14, mostraram resultados preliminares indicativos de possível atividade citotóxica (antiproliferativa). Os resultados positivos indicam a porcentagem de inibição do crescimento e os negativos a porcentagem de morte celular, Tabela 1.

Tabela 1: Resultados da % de inibição (os números negativos indicam % morte das células)

MCF7, mama, densidade de inoculação 5 mil cel/mL;NCIADR , mama resistente, densidade de inoculação 5 mil cel/mL ;UACC62, melanoma, densidade de inoculação 4mil cel/mL;K562, leucemia, densidade de inoculação 6 mil cel/mL;Ensaio SRB (sulforodamina B); dose testada foi de 125mg/mL;

Agradecemos ao IBAMA pela colaboração, durante a coleta de Rauvolfia no Estado de Mato Grosso. Capes/Faep-Unicamp/Fapesp.